بررسی مولکولی ژن تولید کننده پروتئین فاز گرمایی ۶۰ کیلو دالتونی در قارچ بیماری زای میکروسپوروم کنیس

سابقه و هدف: پروتئین های شوک گرمائی (heat shock proteins یا به اختصار hsps) به عنوان chaperone های مولکولی عمل کرده و از طریق تنظیم تا خوردگی و انتقال درون سلولی پروتئین های تازه سنتز شده، سلول را در مقابل صدمات ناشی از استرس های محیطی، محافظت می کنند. این مطالعه با هدف مشخص کردن ژن hsp60 در درماتوفیت پاتوژن میکروسپوروم کانیس انجام شد مواد و روش ها: نمونه قارچ میکروسپوروم کانیس از بیماران مبتلا به درماتوفیتوزیس جمع آوری گردیده و در شرایط مناسب کشت داده شد. dna با وزن ملکولی سنگین که از توده میسلیومی به دست آمد، با روش های استاندارد جدا شد. جفت پرایمرهایی با 21 نوکلئوتید از نواحی حفاظت شـده (highly conserved ) از ژن های hsp60 سایر سلـول های یوکاریـوت، طراحی شد. پرایمرهای ذکر شده به وسیله ی dna ژنومی (template ) جدا شده از میکروسپوروم کانیس در pcr مورد استفاده قرار گرفت. مولکول های پیش بینی شده، تقویت شدند و برای تعیین سکانس فرستاده شدند. یافته ها: توالی نوکلئوتیدی ژن hsp60 به دست آمده شامل 1550 نوکلئوتید است که پروتئینی با 497 آمینواسید را رمز می نماید. نتیجه گیری: در مطالعه حاضر، ما هویت و خصوصیت مولکولی یک ژن از میکروسپوروم کنیس که کدکننده یک پروتئین متعلق به خانواده ی پروتئین شوک حـرارتی 60 کیـلو دالتـونی ملقب به mchsp60 می باشـد را بررسـی کرده ایم. آنالیـز سکانس آمینواسیدی این ژن شباهت قابل توجهی با hsp60 سایر یوکاریوت ها نشان می دهد، چنان که بیش از 97% با c.immitis ، 92% با aspergillus fumigatus و 74% با s.cerevisiae همولوژی دارد. تجزیه و تحلیل ترکیب آمینواسیدی در hsp60 بیانگر غنی بودن آن از آلانین، گلوتامیک اسید و گلایسین است. ترکیب آمینواسیدی mchsp60 نشان دهنده ناچیز بودن مقدار سیستئین و تریپتوفان در آن می باشد